Рнасе А
Рибонуклеаза А (РНасеА) је једноланчани полипептид који садржи 4 дисулфидне везе са молекулском тежином од око 13,7 кДа.РНаза А је ендорибонуклеаза која специфично разграђује једноланчану РНК на Ц и У остацима.Конкретно, цепање препознаје фосфодиестарску везу формирану од 5′-рибозе нуклеотида и фосфатне групе на 3′-рибози суседног пиримидинског нуклеотида, тако да 2,3′-циклични фосфати одговарају хидрофосфатима 3 ′нуклеозидни фосфати (нпр. пГ-пГ-пЦ-пА-пГ се цепа РНазом А да би се генерисали пГ-пГ-пЦп и А-ПГ).РНаза А је најактивнија у цепању једноланчане РНК.Препоручена радна концентрација је 1-100μГ/мЛ, компатибилна са различитим реакционим системима.Ниска концентрација соли (0-100 мМ НаЦл) се може користити за пресецање једноланчане РНК, дволанчане РНК и РНК ланаца формираних хибридизацијом РНК-ДНК.Међутим, при високој концентрацији соли (≥0,3 М), РНКаза А само специфично цепа једноланчану РНК.
РНаза А се најчешће користи за уклањање РНК током припреме плазмидне ДНК или геномске ДНК. Без обзира да ли је ДНаза активна током процеса припреме, може лако утицати на реакцију.Традиционални метод кључања у воденом купатилу може се користити за инактивацију активности ДНазе.Овај производ не садржи ДНазу и протеазу и не захтева топлотну обраду пре употребе.Поред тога, овај производ се такође може користити у експериментима молекуларне биологије као што су анализа заштите РНазе и анализа РНК секвенце.
Услови складиштења
Производ се може чувати на -25～-15℃, важи 2 године.
Упутства
Ово је једна од уобичајених метода за припрему раствора за складиштење РНасе А.Такође се може припремити оддруге методе према традиционалним методама у лабораторији или референтној литератури (нпрдиректно растварање у 10 мМ Трис-ХЦл, пХ 7,5 или Трис-НаЦл раствору)
1. Користите 10 мМ натријум ацетата (пХ 5,2) да припремите 10 мг/мЛ раствора за складиштење РНазе А
2. Грејање на 100 ℃ 15 мин
3. Охладити на собну температуру, додати 1/10 запремине 1 М Трис-ХЦл (пХ 7,4), подесити пХ на 7,4 (зана пример, додајте 500 мл 10г/мл раствора за складиштење РНазе 1М Трис-ХЦЛ, ПХ7.4)
4. Подупаковано на -20℃ за замрзнуто складиштење, које може бити стабилно до 2 године.
[Напомене]: Приликом кључања раствора РНазеА у неутралним условима, формираће се преципитација РНазе;Кувајте га на нижем пХ и ако има падавина може се приметити, што може бити узроковано присуством протеинских нечистоћа.Ако се након кључања нађе седимент, нечистоће се могу уклонити центрифугирањем великом брзином (13000 рпм), а затим подпаковати за складиштење у замрзавању.
Информације о производу
| Синоними | рибонуклеаза И;рибонуклеаза панкреаса;рибонуклеаза 3'-пиримидноолигонуклеотидохидролаза;Рназа А;Ендорибонулцеаза И |
| ЦАС бр. | 9001-99-4 |
| Изглед | Бели лиофилизовани прах |
| Молекуларна тежина | ~ 13,7 кДа (секвенца аминокиселина) |
| ПХ вредност | 7.6 (опсег активности 6-10) |
| Одговарајућа температура | 60℃ (опсег активности 15-70℃) |
| Агент за активирање | Na2+.К+ |
| Инхибитор | Рнасе Инхибитор |
| Метода инактивације | Не може се инактивирати загревањем, препоручује се употреба центрифугалне колоне |
| Порекло | Говеда |
| Растворљивост | Растворљив у води (10 мг/мл) |
| Губитак на сувом | ≤5,0% |
| Активност ензима | ≥60 Куниц јединица/мг |
| Изоелектрична тачка | 9.6 |
Напомене
Ради ваше безбедности и здравља, носите лабораторијске мантиле и рукавице за једнократну употребу за рад.
