Ултра Нуцлеасе ГМП-граде
Каталошки број: ХЦ2016А
УлтраНуцлеасе ГМП-граде се експримира и пречишћава у Есцхерицхиа цоли (Е.цоли) генетичким инжењерингом и припрема у ГМП окружењима.Може смањити вискозитет ћелијског супернатанта и ћелијског лизата у научним истраживањима, повећати ефикасност пречишћавања протеина и побољшати функционална истраживања протеина.Производ такође може да смањи остатке нуклеинске киселине домаћина до пг-граде, побољшавајући перформансе и безбедност биолошких производа примена укључујући пречишћавање вируса, производњу вакцина и производњу протеина/полисахарида фармацеутских производа.Осим тога, производ се такође може применити за спречавање згрушавања мононуклеарних ћелија људске периферне крви (ПБМЦ) у ћелијској терапији и развоју вакцине.
УлтраНуклеаза је обезбеђена у облику стерилизованог реагенса, елуираног у пуферу (20 мМ Трис-ХЦЛ пХ 8,0, 2 мМ МгЦл, 20 мМ НаЦл, 50% глицерин), са изгледом безбојне, провидне течности.Овај производ је произведен према захтевима ГМП процеса и испоручен је у течном облику.
Компоненте
УлтраНуцлеасе ГМП квалитета (250 У/μЛ)
Услови складиштења
Производ се испоручује са сувим ледом и може се чувати на -25℃~-15°Ц две године.
Ако је производ отворен и чуван на 4℃ дуже од недељу дана, препоручујемо филтрирањепроизвод за спречавање микробне контаминације.
Спецификације
| Екпрессион Хост | Рекомбинантна Е. цоли са геном УлтраНуцлеасе |
| Молекуларна тежина | 26,5 кДа |
| соелектрична тачка | 6.85 |
| Чистоћа | ≥99% (СДС-ПАГЕ) |
| Стораге Буффер | 20 мМ Трис-ХЦЛ пХ 8,0, 2 мМ МгЦл, 20 мМ НаЦл, 50% глицерин |
|
Дефиниција јединице | Дефиниција једне јединице активности (У) је количина ензима на коју се користипромени вредност апсорпције ΔА260 за 1,0 за 30 минута у 2,625 мЛреакциони систем на 37 ℃ са пХ од 8,0 (еквивалентно потпуном варењу37 μг ДНК сперме лососа у олигонуклеотиде). |
Упутства
1. Узорак Цоллецтион
Адхерентне ћелије: уклоните медијум, оперите ћелије са ПБС и уклоните супернатант.
Суспензиране ћелије: сакупите ћелије центрифугирањем, исперите ћелије са ПБС, центрифугирајте на 6.000о/мин 10 мин, сакупите пелет.
Есцхерицхиа цоли: сакупите бактерије центрифугирањем, једном исперите ПБС, центрифугирајте на 8.000рпм током 5 мин, и сакупите пелет.
2. Третман узорком
Сакупљене ћелијске пелете третирати пуфером за лизу у односу маса(г) према запремини(мЛ)1:(10-20), или механичким или хемијским методама на леду или на собној температури (1г ћелијске пелете садржи око
109 ћелија).
3. Ензимски третман
Додајте 1-5 мМ МгЦл у реакциони систем и подесите пХ на 8-9.
Додајте УлтраНуцлеасе у односу на 250 јединица за варење 1 г ћелијских пелета, инкубирајте на 37 ℃ више од 30 минута.Молимо погледајте образац „Препоручено време реакције“ да бисте изабралитрајање лечења.
4. Супернатант Цоллецтион
Центрифугирајте на 12.000 о/мин 30 минута и сакупите супернатант.
Напомена: Ако је раствор кисели или алкални, или садржи високе концентрације соли, детерџената илиденатуранти, повећајте дозу ензима или продужите време лечења у складу са тим.
Препоручени услови реакцијеонс
| Параметар | Оптимал Цондитион | Ефективни кондитор |
| Мг²+Концентрација | 1-5 мМ | 1-10 мМ |
| pH | 8-9 | 6-10 |
| Температура | 37℃ | 0-42℃ |
| ДТТ концентрација | 0-100 мМ | >0 мМ |
| Концентрација меркаптоетанола | 0-100 мМ | >0 мМ |
| Концентрација моновалентног катјона | 0-20 мМ | 0-150 мМ |
| Концентрација фосфата | 0-10 мМ | 0-100 мМ |
Препоручено Реакција време (37 ℃, 2 mM Mg²+, pH 8.0)
| Количина ултрануклеазе (коначна концентрација) | Време реакције |
| 0,25 У/мЛ | >10 х |
| 2,5 У/мЛ | >4х |
| 25 У/мЛ | 30 мин |
напомене:
Носите неопходну ЛЗО, као што је лабораторијски мантил и рукавице, како бисте осигурали своје здравље и сигурност!
