Рнасе А
Рибонуклеаза А(РНасеА) је једноланчани полипептид који садржи 4 дисулфидне везе са молекулском тежином од око 13,7 кДа.РНаза А је ендорибонуклеаза која специфично разграђује једноланчану РНК на Ц и У остацима.Конкретно, цепање препознаје фосфодиестарску везу формирану 5'-рибозом нуклеотида и фосфатном групом на 3'-рибози суседног пиримидинског нуклеотида, тако да се 2,3'-циклични фосфати хидролизирају до одговарајућег 'нуклеозидни фосфати (нпр. пГ-пГ-пЦ-пА-пГ цепа РНаза А да би се створио пГ-пГ-пЦп и А-ПГ).РНаза А је најактивнија у цепању једноланчане РНК.Препоручена радна концентрација је 1-100 μ Г/мЛ, компатибилна са различитим реакционим системима.Ниска концентрација соли (0-100 мМ НаЦл) се може користити за пресецање једноланчане РНК, дволанчане РНК и РНК ланаца формираних хибридизацијом РНК-ДНК.
Међутим, при високој концентрацији соли (≥0,3 М), РНКаза А само специфично цепа једноланчану РНК.
РНаза А се најчешће користи за уклањање РНК током припреме плазмидне ДНК или геномске ДНК.Без обзира да ли је ДНаза активна током процеса припреме, може лако утицати на реакцију.Традиционални метод кључања у воденом купатилу може се користити за инактивацију активности ДНазе.Овај производ не садржи ДНазу и протеазу и не захтева топлотну обраду пре употребе.Поред тога, овај производ се такође може користити у експериментима молекуларне биологије као што су анализа заштите РНазе и анализа РНК секвенце.
Услови складиштења
Производ треба чувати на -25℃~- 15℃ 2 године.
Спецификације
| Изглед | Пудер |
| Количина | 100мг / 1г |
| Врста производа | РНаза А |
Упутства
Ово је једна од уобичајених метода за припрему раствора за складиштење РНасе А.Такође се може припремитидругим методама према традиционалним методама у лабораторији или референтној литератури (као нпрдиректно растварање у 10 мМ Трис-ХЦл, пХ 7,5 или Трис-НаЦл раствору)
1. Користите 10 мМ натријум ацетата (пХ 5,2) да припремите 10 мг/мЛ раствора за складиштење РНазе А.
2. Грејање на 100 ℃ 15 мин.
3. Охладити на собну температуру, додати 1/10 запремине 1 М Трис-ХЦл (пХ 7,4), подесити пХ на 7,4 (зана пример, додати 500 мЛ 10 мг/мЛ раствора за складиштење РНКазе 1 М Трис-ХЦл, пХ 7,4).
4. Подупаковано на -20℃ за замрзнуто складиштење, које може бити стабилно до 2 године.
[Белешке]:
Када се раствор РНазеА кључа у неутралним условима, формираће се преципитација РНазе;Кувајте га на нижем пХ и ако има падавина може се приметити, што може бити узроковано присуством протеинских нечистоћа.Ако се након кључања пронађе седимент, нечистоће се могу уклонити центрифугирањем великом брзином (13000 рпм), а затим подпаковати за складиштење у замрзавању.
Напомене
Носите неопходну ЛЗО, као што је лабораторијски мантил и рукавице, како бисте осигурали своје здравље и безбедност.
