Оне Степ РТ-кПЦР СИБР Греен Премик
Каталошки број: ХЦБ5140А
Оне Степ РТ-кПЦР Сибер Греен Премик је за квантификацију флуоресценције на основу СИБР Греен И боје.Користећи ген-специфичне прајмере, реверзна транскрипција и кПЦР реакције се завршавају у једној епрувети, елиминишући потребу за поновљеним операцијама отварања поклопца и пипетирања, значајно побољшавајући ефикасност анализе и смањујући ризик од контаминације.За узорке РНК, комплет користи реверзну транскриптазу отпорну на топлоту за ефикасну синтезу цДНК и ХотСтарт Так ДНК полимеразу за квантитативно појачање.Под оптимизованим пуфер системом, осетљивост комплета може бити чак 0,1 пг за високо изражене мете и чак 1 пг за умерено изражене мете.Комплет је погодан за амплификацију и квантификацију ДНК узорака.Омогућава осетљиву детекцију и квантификацију нуклеинских киселина из различитих биљних и животињских узорака, ћелија и микроорганизама.
Компоненте
| No | Име | Волуме | Волуме |
| 1 | Адванцед Буффер | 250 μЛ | 2×1,25 мЛ |
| 2 | Напредна мешавина ензима | 20 μЛ | 200 μЛ |
| 3 | РНасе без Х2O | 250 μЛ | 2×1,25 мЛ |
Услови складиштења
Овај производ треба чувати на -25 ~ -15 ℃ далеко од светлости 1 годину.
Упутства
1.Конфигурација реакционог системаd
| Компоненте | Запремина (μЛ) | Запремина (μЛ) | Коначна концентрација |
| Адванцед Буффер | 12.5 | 25 | 1× |
| Напредна мешавина ензима | 1 | 2 | - |
| Форвард Пример (10 μмол/Л)a | 0.5 | 1 | 0,2 μмол/Л |
| Реверзни прајмер (10 μмол/Л)a | 0.5 | 1 | 0,2 μмол/Л |
| РНА Тамплатеb | X | X | - |
| РНасе без Х2Оc | до 25 | до 50 | - |
напомене:
1) а.Тконачна концентрација прајмера била је 0,2 μмол/Л, која се такође може подесити између 0,1 и 1 μмол/Л према потреби.
2) б.Реагенс је изузетно осетљив, са укупном РНК у опсегу од 1пг-1μг, а тестирање људских узорака показало је оптималан унос од 1 пг-100 нг, контролишући укупну вредност Цт у опсегу од 15-30 према потреби.
3) ц.Препоручује се употреба 20 μЛ или 50 μЛ да би се обезбедила валидност и поновљивост амплификације циљног гена.
4) д.Молимо припремите се у ултра-чистој клупи и користите врхове и реакционе епрувете без остатака нуклеазе;савети са филтер патронама се препоручују.Избегавајте унакрсну контаминацију и контаминацију аеросолом.
2.Програм реаговања
| Корак циклуса | Темп. | време | Циклуси |
| Реверзна транскрипција | 50℃a | 6минс | 1 |
| Почетна денатурација | 95℃ | 5минс | 1 |
| Реакција појачања | 95℃ | 15 сец | 40 |
| 60℃b | 30 сец | ||
| Фаза криве топљења | Инструмент Дефаултс | 1 | |
напомене:
1) а.Температура реверзне транскрипције може се изабрати између 50-55°Ц у складу са експерименталним потребама.За узорке ДНК, процес реверзне транскрипције се може изоставити.
2) б.У посебним случајевима температура жарења/продуживања се може подесити према вредности прајмера Тм, препоручује се 60°Ц.
Напомене
1. Овај производ је само за истраживачку употребу.
2. Ради ваше безбедности радите са лабораторијским мантилима и рукавицама за једнократну употребу.
