Мултиплек кПЦР Пробе Премик
Каталошки број: ХЦБ5051А
ТакМан мултиплек кПЦР Мастер Мик (на бази боје) је претходно решење за 2 × квантитативну ПЦР амплификацију у реалном времену коју карактерише висока осетљивост и специфичност, која је плаве боје и има ефекат додавања узорка.Овај производ је 2× Мик претходно помешани реагенс који омогућава до четири флуоресцентне квантитативне ПЦР реакције у једној реакционој посуди.Овај производ садржи методу генетски модификованих антитела за хот-старт Так ензим, значајно побољшавајући осетљивост и специфичност амплификације.У исто време, овај производ је дубоко оптимизовао мултиреакциони пуфер, који може побољшати ефикасност амплификације реакције и промовисати ефикасно појачање шаблона ниске концентрације.Овај производ се може користити за генотипизацију и мултиплекс квантитативну анализу.
Спецификација
| Хот Старт | Уграђени врући старт |
| Метода детекције | Детекција прајмера и сонде |
| ПЦР метода | кПЦР |
| Полимераза | Так ДНК полимераза |
| Врста узорка | ДНК |
Услови складиштења
Производ се испоручује са сувим ледом и може се чувати на -25~-15℃ 2 године.
Упутства
1. РеакцијаСистем
| Компоненте | Запремина (μЛ) | Коначна концентрација |
| 2× ТакМан мултиплекс кПЦР Мастер Мик | 12.5 | 1× |
| Прајмер мешавина (10 μмол/Л) a | × | 0,1 - 0,5 μмол/Л |
| Мешавина сонде (10 μмол/Л)b | × | 50 - 250 нмол/Л |
| Рок референтна боја | 0.5 | 1× |
| Шаблон ДНК/цДНК | 1-10 | - |
| ддХ2O | до 25 | - |
напомене:Пре употребе добро промешати да би се избегло стварање мехурића услед снажног трешења.
а.Концентрација прајмера: Примена прајмера садржи више парова прајмера, обично сваки прајмер у коначној концентрацији од 0,2 μмол/Л и такође се може подесити између 0,1 и 0,5 μмол/Л према потреби.
б.Концентрација сонде: Пробе Мик садржи више сонди са различитим сигналима флуоресценције, а концентрација сваке сонде се може подесити између 50 и 250 нмол/Л у складу са специфичном ситуацијом.
1.Референца за Рок боју: Користи се на инструменту за ПЦР амплификација у реалном времену као што је Апплиед Биосистемс за исправљање грешке флуоресцентног сигнала генерисаног између бунара;овај производ не садржи референцу Рок боје.Цас#10200 се препоручује ако је потребно.
2.Разблаживање шаблона: кПЦР је веома осетљив и препоручује се да се шаблон разблажи за употребу.Ако је шаблон основни раствор цДНК, запремина шаблона не би требало да прелази 1/10 укупне запремине.
3.Реакциони систем: препоручује се 25 μЛ, 30 μЛ или 50 μЛ да би се обезбедила ефикасност и поновљивост амплификације циљног гена.
4.Припрема система: Молимо припремите се у супер чистој клупи и користите врхове и реакционе епрувете без остатака нуклеазе;препоручљиво је користити врхове са патронама филтера.Избегавајте унакрсну контаминацију и контаминацију аеросолом.
2.Програм реаговања
| Корак циклуса | Темп. | време | Циклуси |
| Иницијална-денатурација | 95 ℃ | 5минс | 1 |
| Денатурација | 95 ℃ | 15сец | 45 |
| Жарење/продужење | 60 ℃ | 30сец |
напомене:
1.Жарење/продужење: Температура и време се могу на одговарајући начин подесити према пројектованој вредности Тм прајмера.
2.Аквизиција флуоресцентног сигнала: Време аквизиције флуоресцентног сигнала потребно за различите инструменте за кПЦР детекцију је различито, молимо вас да подесите у складу са минималним временским ограничењем.Време неколико уобичајених инструмената је подешено на следећи начин:
20 сек: Апплиед Биосистемс 7700, 7900ХТ, 7500 Фаст
31 сек: Примењени биосистеми 7300
32 сек: Апплиед Биосистемс 7500
Напомене
Носите неопходну ЛЗО, као што је лабораторијски мантил и рукавице, како бисте осигурали своје здравље и сигурност!
