Комплет за екстракцију вирусне ДНК/РНА
Овај комплет је погодан за брзу екстракцију вирусне ДНК/РНА високе чистоће из узорака као што су назофарингеални брисеви, брисеви животне средине, супернатанти ћелијске културе и супернатанти хомогената ткива.Комплет је заснован на технологији пречишћавања мембране од силицијум диоксида која елиминише потребу за коришћењем органских растварача фенола/хлороформа или дуготрајне преципитације алкохола за екстракцију вирусне ДНК/РНА високог квалитета.Добијене нуклеинске киселине су без нечистоћа и спремне су за употребу у низводним експериментима као што су реверзна транскрипција, ПЦР, РТ-ПЦР, ПЦР у реалном времену, секвенцирање следеће генерације (НГС) и Нортхерн блот.
Услови складиштења
Чувати на 15 ~ 25 ℃ и транспортовати на собној температури
Компоненте
| Компоненте | 100РКСНС |
| Буффер ВЛ | 50 мл |
| Буффер РВ | 120 мл |
| ддХ2 О без РНазе | 6 мл |
| ФастПуре РНК колоне | 100 |
| Тубе за сакупљање (2мл) | 100 |
| Епрувете за сакупљање без РНазе (1,5 мл) | 100 |
Буффер ВЛ:Обезбедите окружење за лизу и везивање.
Буффер РВ:Уклоните заостале протеине и друге нечистоће.
ддХ2О без РНазе:Елуирати ДНК/РНА са мембране у спин колони.
ФастПуре РНК колоне:Конкретно, адсорбују ДНК/РНА.
Тубе за сакупљање 2 мл:Сакупити филтрат.
Епрувете за сакупљање без РНазе 1,5 мл:Сакупите ДНК/РНА.
Апликације
Брисеви назофаринкса, брисеви животне средине, супернатанти ћелијске културе и супернатанти хомогената ткива.
Самоспремни Материалс
Врхови пипета без РНазе, епрувете за центрифугирање без РНазе, центрифуга, вортекс миксер и пипете.
Експеримент процес
Обавите све следеће кораке у кабинету за биолошку безбедност.
1. Додати 200 μл узорка у епрувету за центрифугирање без РНазе (допунити са ПБС или 0,9% НаЦл у случају недовољног узорка), додати 500 μл пуфера ВЛ, добро промешати вортексирањем 15 – 30 секунди и центрифугирати накратко да сакупите смешу на дну епрувете.
2. Ставите ФастПуре РНК колоне у епрувете за сакупљање од 2 мл.Пренесите смешу из Корака 1 у ФастПуре РНК колоне, центрифугирајте на 12.000 рпм (13.400 × г) 1 мин, и баците филтрат.
3. Додајте 600 μл пуфера РВ у ФастПуре РНК колоне, центрифугирајте на 12.000 рпм (13.400 × г) 30 секунди и баците филтрат.
4. Поновите корак 3.
5. Центрифугирајте празну колону на 12.000 рпм (13.400 × г) 2 мин.
6. Пажљиво пребаците ФастПуре РНК колоне у нове епрувете за сакупљање без РНазе од 1,5 мл (испоручене у комплету), и додајте 30 – 50 μл ддХ2О без РНазе у центар мембране без додиривања колоне.Оставите да стоји на собној температури 1 мин и центрифугирајте на 12.000 о/мин (13.400 × г) 1 мин.
7. Одбаците ФастПуре РНК колоне.ДНК/РНА се може користити директно за наредне тестове, или се може чувати на -30~-15°Ц у кратком периоду или на -85 ~-65°Ц током дужег периода.
Напомене
Само за истраживачку употребу.Није за употребу у дијагностичким процедурама.
1. Уравнотежите узорке на собну температуру унапред.
2. Вируси су веома заразни.Уверите се да су предузете све неопходне мере предострожности пре експеримента.
3. Избегавајте поновно замрзавање и одмрзавање узорка, јер то може довести до деградације или смањеног приноса екстраховане вирусне ДНК/РНК.
4. Опрема која се самостално припрема укључује врхове пипета без РНазе, епрувете за центрифугирање без РНазе, центрифугу, вортекс миксер и пипете.
5. Када користите комплет, носите лабораторијски мантил, рукавице од латекса за једнократну употребу и маску за једнократну употребу и користите потрошни материјал без РНасе да бисте смањили ризик од контаминације РНасе.
6. Обавите све кораке на собној температури осим ако није другачије назначено.
Механизам и радни ток
