Оне Степ Фаст РТ-кПЦР сонда Премик-УНГ
Каталошки број: ХЦР5143А
Оне Степ РТ-кПЦР Пробе Кит (ФОР ФАСТ) је РТ-кПЦР комплет за брзу детекцију заснован на сонди погодан за једноплекс или мултиплекс квантитативни ПЦР користећи РНК као шаблон (као што је РНК вирус).Овај производ користи нову генерацију Так ДНК полимеразе модификоване антителима и посвећену реверзну транскриптазу у једном кораку, са оптимизованим пуфером за брзо појачање, који има бржу брзину амплификације, већу ефикасност и специфичност амплификације.Подржава уравнотежено појачање иу синглеплексу иу мултиплексу узорака ниске и високе концентрације за кратко време.
Компоненте
1. 5×РТ-кПЦР пуфер (У+)
2. Мешавина ензима (У+)
напомене:
а.5×РТ-кПЦР пуфер (У+) укључује дНТП и Мг2+;
б.Мешавина ензима (У+) укључује реверзну транскриптазу, Хот Старт Так ДНК полимеразу, инхибитор РНазе и УДГ;
ц.Користите савете без РНасе, ЕП епрувете итд.
Пре употребе, темељно промешајте пуфер 5×РТ-кПЦР (У+).Ако има било каквих падавина након одмрзавања, сачекајте да се пуфер врати на собну температуру, промешајте и растворите, а затим их користите нормално.
Услови складиштења
Производ се испоручује са сувим ледом и може се чувати на -25~-15℃ 1 годину.
Упутства
1. Реакција Систем
| Компоненте | Запремина (20 μЛ реакција) |
| 2 ×РТ-кПЦР пуфер | 4μЛ |
| Мешавина ензима (У+) | 0.8μЛ |
| Пример Форвард | 0,1~ 1,0 μМ |
| Пример Реверсе | 0,1~ 1,0 μМ |
| ТакМан сонда | 0,05~0,25μМ |
| Темплате | Кс μЛ |
| Вода без РНазе | до 25μЛ |
Напомене: Запремина реакције је 10-50μЛ.
2. Протокол бициклизма (Стандар)
| Циклус Корак | Темп. | време | Циклуси |
| Реверзна транскрипција | 55 ℃ | 10 мин | 1 |
| Иницијална денатурација | 95 ℃ | 30 сец | 1 |
| Денатурација | 95 ℃ | 10 сец | 45 |
| Жарење/продужење | 60 ℃ | 30 сец |
| Цицлинг Протоцол (брзо) Циклус Корак |
Темп. |
време |
Циклуси |
| Реверзна транскрипција | 55 ℃ | 5 мин | 1 |
| Иницијална денатурација | 95 ℃ | 5 с | 1 |
| Денатурација | 95 ℃ | 3 с | 43 |
| Жарење/продужење | 60 ℃ | 10 с |
напомене:
а.Температура реверзне транскрипције је између 50 ℃ и 60 ℃, повећање температуре помаже да се појачају сложене структуре и шаблони са високим садржајем ЦГ;
б.Оптимална температура жарења треба да се подеси на основу Тм вредности прајмера и да се изабере најкраће време за прикупљање сигнала флуоресценције на основу ПЦР инструмента у реалном времену.
Напомене
Носите неопходну ЛЗО, као што је лабораторијски мантил и рукавице, како бисте осигурали своје здравље и сигурност!
