2×ХиФ Так плус Мастер Мик
Каталошки број: ХЦР2014Б
ХИФ Так плус Мастер Мик (са бојом) је 2×премешано решење спремно за употребу које садржи Плус ХИФ ДНК полимеразу, дНТПс и оптимизовани пуфер.Два моноклонска антитела на собној температури која инхибирају активност полимеразе и активност 3′→5′ексонуклеазе додају се главној мешавини за лак и високо специфичан Хот Старт ПЦР.Фактор екстензије се додаје главној мешавини да би се ензиму дао капацитет амплификације дугог фрагмента, дужина амплификације може бити до 13 кб, ензим има активност 5′→3′ ДНК полимеразе и 3′→5′ активност егзонуклеазе, њена верност је 83 пута већа од Так ДНК полимеразе, што је 9 пута више од обичне ДНК полимеразе.Погодан је за појачавање сложених шаблона, производ за појачавање је туп крај.
2×ХИФ Так плус Мастер Мик (са бојом) има предности брзог и једноставног, високе осетљивости, јаке специфичности, добре стабилности, итд., реакционом систему треба само додати прајмере и шаблоне, а може се појачати помоћу два протокол корака, поједностављујући експерименталне кораке и уштеду времена.Овај производ садржи индикаторске боје за електрофорезу, а ПЦР производи се могу користити директно за електрофорезу.Поред тога, производ садржи и специфично заштитно средство, тако да главна мешавина може да одржи стабилну активност након поновљеног замрзавања-одмрзавања.
Услови складиштења
Производе треба чувати на -25~-15℃ 1 годину.
Спецификације
Спецификација производа | Мастер Мик |
Концентрација | 2× |
Хот Старт | Уграђени Хот Старт |
Оверханг | Блунт |
Брзина реакције | Рапид |
Величина (коначни производ) | До 13 кб |
Услови за превоз | Суви лед |
Врста производа | ПЦР премикси високе верности |
Упутства
1.ПЦР реакциони систем
Компоненте | Запремина (μЛ) |
ДНК шаблон | Погодан |
Предњи прајмер (10 μмол/Л) | 2.5 |
Реверзни прајмер (10 μмол/Л) | 2.5 |
2×ХИФ Так плус Мастер Мик | 25 |
ддХ2O | до 50 |
2.Препоручена употреба различитих шаблона
Тип шаблона | Појачајте фрагменте од 1 кб до 10 кб |
Геномска ДНК | 50нг-200нг |
Плазмид или вирусна ДНК | 10пг-20нг |
цДНК | 1-2,5 µЛ (не прелази 10% коначне запремине ПЦР реакције) |
3.Амплифицатион Протоцол
1) Протокол у два корака (шаблон сложености)
Корак циклуса | Темп. | време | Циклуси |
Почетна денатурација | 98℃ | 3 мин | 1 |
Денатурација | 98℃ | 10сец | 30-35 |
Продужетак | 68℃ | 30 сек/кб | |
Завршно продужење | 72℃ | 5 мин | 1 |
2) Протокол у три корака (обичан протокол)
Корак циклуса | Темп. | време | Циклуси |
Почетна денатурација | 98℃ | 3 мин | 1 |
Денатурација | 98℃ | 10сец | 30-35 |
Жарење | 60℃ | 20 сец | |
Продужетак | 72℃ | 30 сек/кб | |
Завршно продужење | 72℃ | 5 мин | 1 |
3) Протокол градијента жарења (шаблон сложености)
Корак циклуса | Температура | време | Циклуси |
Почетна денатурација | 98℃ | 3 мин | 1 |
Денатурација | 98℃ | 10 сец | 15 (1℃ смањење по циклусу) |
Градијентно жарење | 70-55℃ | 20 сец | |
Продужетак | 72℃ | 30 сек/кб | |
Денатурација | 98℃ | 10 сец |
20 |
Жарење | 55℃ | 20 сец | |
Продужетак | 72℃ | 30 сек/кб | |
Завршно продужење | 72℃ | 5 мин | 1 |
Карактеристике под различитим протоколом за појачавање
Протоцоl | Два корака | Три корака | Градијентно жарење |
Спец. | брзо | средње | спор |
Специфичност | висока | средње | висока |
ПЦР принос | средње | висока | средње |
Стопа детекције | висока | средње | висока |
Напомене
Носите неопходну ЛЗО, као што је лабораторијски мантил и рукавице, како бисте осигурали своје здравље и сигурност!