Ултра Нуцлеасе
УлтраНуклеаза је генетски инжењеринг ендонуклеза изведена из Серратиа марцесценс, која је способна да разгради ДНК или РНК, било дволанчану или једноланчану, линеарну или кружну под широким опсегом услова, потпуно разгради нуклеинске киселине у 5'-монофосфатне базе са дужином олигонуклеоти 3-5 .Након модификације генетског инжењеринга, производ је ферментисан, експримиран и пречишћен у Есцхерицхиа цоли (Е. цоли), што смањује вискозитет ћелијског супернатанта и ћелијског лизата научно истраживање, али и побољшава ефикасност пречишћавања и функционално истраживање протеина.Такође се може користити у генској терапији, пречишћавању вируса, производњи вакцина, фармацеутској индустрији протеина и полисахарида као реагенс за уклањање остатака нуклеинске киселине домаћина.
Карактеристике производа
ЦАС бр. | 9025-65-4 |
ЕЦ бр. | |
Молекуларна тежина | 30кДа |
Изоелектрична тачка | 6.85 |
Чистоћа протеина | ≥99% (СДС-ПАГЕ & СЕЦ-ХПЛЦ) |
Специфиц Ацтивити | ≥1.1×106У/мг |
ОптимумТемпературе | ден: 37°Ц |
Оптимални пХ | 8.0 |
ПротеасеАцтивити | негативан |
Биобурден | <10ЦФУ/100,000У |
Резидуални протеин ћелије домаћина | ≤10ппм |
Хеави Метал | ≤10ппм |
Бактеријски ендотоксин | <0,25ЕУ/1000У |
Стораге Буффер | 20 мМ Трис-ХЦл, пХ 8,0, 2 мМ МгЦл2 , 20 мМ НаЦл, 50% глицерол |
Услови складиштења
≤0°Ц транспорт;-25~-15°Ц Складиштење, 2 године ваљаности (избегавајте замрзавање-одмрзавање).
Дефиниција јединице
Количина ензима коришћена за промену вредности апсорпције △А260 за 1,0 у року од 30 минута на 37 °Ц, пХ 8,0, што је еквивалентно дигестираној ДНК сперме лососа од 37 μг сечењем на олигонуклеотиде, дефинисана је као активна јединица (У).
Контрола квалитета
Резидуални протеин ћелије домаћина: ЕЛИСА комплет
•Протеасе Остаци: 250КУ/мЛ УлтраНуклеаза је реаговала са супстратом током 60 минута, није откривена активност.
•Бактеријски ендотоксин: ЛАЛ-тест, Фармакопеја Народне Републике Кине, том 4 (издање 2020.) метода теста ограничења гела.Општа правила (1143).
•Биооптерећење: Фармакопеја Народне Републике Кине, том 4 (издање 2020.)— Опште
Правила за тестирање стерилности (1101), Национални стандард НР Кине, ГБ 4789.2-2016.
•Хеви метал:ИЦП-АЕС, ХЈ776-2015.
Операција
Активност ултрануклеазе је била значајно инхибирана када је концентрација СДС била преко 0,1% или ЕДТА
концентрација је била преко 1 мМ. Сурфактант Тритон Кс-100, Твеен 20 и Твеен 80 нису имали утицаја на нуклеазу
својства када је концентрација била испод 1,5%.
Операција | Оптимални рад | Валид Оператион |
Температура | 37℃ | 0-45℃ |
pH | 8.0-9.2 | 6.0- 11.0 |
Мг2+ | 1-2мМ | 1- 15мМ |
ДТТ | 0- 100мМ | >100мМ |
2-Меркаптоетанол | 0- 100мМ | >100мМ |
Моновалентни метални јон (На+, К+ итд.) | 0-20мМ | 0-200мМ |
ПО43- | 0- 10мМ | 0- 100мМ |
Употреба и дозирање
• Уклоните егзогену нуклеинску киселину из производа вакцине, смањите ризик од резидуалне токсичности нуклеинске киселине и побољшате безбедност производа.
• Смањите вискозитет течности за храну узроковану нуклеинском киселином, скратите време обраде и повећајте принос протеина.
• Уклоните нуклеинску киселину којом је омотана честица (вирус, инклузиона тела, итд.), која је погодна
до ослобађања и пречишћавања честице.
Експериментални тип | Производња протеина | Вирус, вакцина | Целл Другс |
Број ћелија | 1 г влажне тежине ћелије (ресуспендован са 10 мл пуфера) | 1Л ферментације течни супернатант | 1Л културе |
Минимална доза | 250У | 100У | 100У |
Препоручена доза | 2500У | 25000У | 5000У |
• Третман нуклеазом може побољшати резолуцију и опоравак узорка за колонску хроматографију, електрофорезу и блот анализу.
• У генској терапији, нуклеинска киселина се уклања да би се добили пречишћени вируси повезани са адено.