алкална фосфатаза (АЛП)
Опис
Алкална фосфатаза је изведена из рекомбинантног соја Е. цоли који носи ген ТАБ5.Ензим катализује дефосфорилацију 5´ и 3´ крајева ДНК и РНК фосфомоноестара.Такође, хидролизује рибозу, као и деоксирибонуклеозид трифосфате (НТП и дНТП).ТАБ5 алкална фосфатаза делује на 5´ избочене, 5´ удубљене и тупе крајеве.Фосфатаза се може користити у многим апликацијама у молекуларној биологији, као што је клонирање или обележавање краја сонде да би се уклонили фосфорилисани крајеви ДНК или РНК.У експериментима клонирања, дефосфорилација спречава линеаризовану плазмидну ДНК од самолигирања.Такође може да разгради неинкорпорисане дНТП у ПЦР реакцијама да би припремио шаблон за секвенцирање ДНК.Ензим се потпуно и неповратно инактивира загревањем на 70°Ц током 5 минута, чиме уклањање фосфатазе пре везивања или обележавања краја постаје непотребно.
Употреба
1.Алкална фосфатаза спојена са протеинима (антитела, стрептавидин итд.) може специфично да идентификује циљне молекуле и може се користити у ЕЛИСА, ВБ и хистохемијској детекцији;
2.Алкална фосфатаза се може користити за дефосфоризацију 5'-терминала ДНК или РНК да би се спречило самовезивање;
3. Горе наведена дефосфорилисана ДНК или РНК може бити обележена радио-обележеним фосфатима (преко Т4 поли-нуклеотид киназе)
Хемијска структура
Спецификација
Тест Итемс | Спецификације |
Ензимска активност | 5У/μЛ |
Активност ендонуклеазе | Није откривено |
Активност егзонуклеазе | Није откривено |
Ницкинг Ацтивити | Није откривено |
Активност РНасе | Није откривено |
Е.цоли ДНК | ≤1цопи/5У |
Ендотоксин | ЛАЛ-тест, ≤10ЕУ/мг |
Чистоћа | ≥95% |
Транспорт и складиштење
Транспорт:АмбИент
Складиште :Чувати на 2-8°Ц
Препоручено поновно тестирањеживот:2 године